二。霉菌孢子的制備 霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮,麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28度,培養(yǎng)時間為4~14d。
種子制備 種子制備是將固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)出的孢子或菌體轉入到液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),使其繁殖成大量菌絲或菌體的過程。種子制備所使用的培養(yǎng)基和其他工藝條件,都要有利于孢子發(fā)芽、菌絲繁殖或菌體增殖。
1。搖瓶種子制備 某些孢子發(fā)芽和菌絲繁殖速度緩慢的菌種,需將孢子經(jīng)搖瓶培養(yǎng)成菌絲后再進入種子罐,這就是搖瓶種子。搖瓶相當于微縮了的種子罐,其培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件與種子罐相似。
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌素生長。原則上各種營養(yǎng)成分不易過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
2。種子罐種子制備 種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子被接入到體積較小發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,進過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
種子罐的級數(shù)主要決定于菌種的性質和菌體生長速度及發(fā)酵設備的合理應用,種子制備的目的是要形成一定數(shù)量和質量的菌體。孢子發(fā)芽和菌體開始繁殖時,菌體量很少,子啊小型罐內即可進行。發(fā)酵的目的是過得大量的發(fā)酵產物。產物是在菌體大量形成并達到一定生長階段后形成,需要在大型發(fā)酵罐內才能進行。同時若干發(fā)酵產物的產生菌,其不同生長階段對營養(yǎng)和培養(yǎng)條件的要求有差異。因此,將兩個不同、工藝要求有差異的生物學過程放在一個大罐內進行,既影響發(fā)酵產物的產量,又會造成動力和設備的浪費。種子罐級數(shù)減少,有利于生產過程的簡化及發(fā)酵過程的控制,可以減少因種子生長異常而造成發(fā)酵的波動。
(3)種子培養(yǎng) 種子培養(yǎng)要求一定量的種子,在適宜的培養(yǎng)基中,控制一定的培養(yǎng)條件和培養(yǎng)方法,從而保證種子正常生長。工業(yè)微生物培養(yǎng)法分為靜置培養(yǎng)和通氣培養(yǎng)兩大類型,靜置培養(yǎng)法即將培養(yǎng)基盛于發(fā)酵容器中,在接種后,不通空氣進行培養(yǎng)。而通氣培養(yǎng)法的生產菌種以需氧菌和兼性需氧菌居多,他們生長的環(huán)境必須供給空氣,以維持一定的溶解氧水平,使菌體迅速生長和發(fā)酵,又稱為好氣性培養(yǎng)。(未完待續(xù))