對(duì)微生物育種來(lái)說(shuō)，有性重組的局限性很大，這是因?yàn)槠癜l(fā)現(xiàn)的具有雜交過(guò)程的生命現(xiàn)象的微生物并不多，這就妨礙了基因重組在微生物育種中的普遍應(yīng)用。原生質(zhì)體融合技術(shù)提供了充分利用遺傳重組和雜交的方法。原生質(zhì)體融合技術(shù)首先是在動(dòng)植物細(xì)胞融合研究的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，然后才應(yīng)用于真菌、細(xì)菌和放線菌。由于這一技術(shù)可以打破種屬間的界限，提高重組頻率，礦大重組幅度，而備受關(guān)注。

一，原生質(zhì)體融合的優(yōu)越性

原生質(zhì)體融合的方法是首先用生物酶分別酶解兩個(gè)出發(fā)菌屬的細(xì)胞壁，在高滲環(huán)境中釋放出原生質(zhì)，將兩個(gè)出發(fā)菌株的原生質(zhì)體混合，在助溶劑或電廠作用下，使它們互相凝集，發(fā)生細(xì)胞融合，實(shí)現(xiàn)遺傳種族。

二，原生質(zhì)體融合方法

原生質(zhì)體融合技術(shù)的一般程序包括原生質(zhì)體的制備、肢體的再生和融合子的篩選等步驟。

1，原生質(zhì)體制備 施用各種酶解兩個(gè)出發(fā)菌株的細(xì)胞壁，使其細(xì)胞壁消化或部分破裂，釋放出原生質(zhì)體，為防止原生質(zhì)體內(nèi)不滲透壓過(guò)高而破裂，必須將原生質(zhì)體釋放到高滲溶液中。由于各種微生物細(xì)胞壁的組成不同，須采用不同的原生質(zhì)體制備方法。

2，原生質(zhì)體融合和再生 兩個(gè)出發(fā)菌株制備好的原生質(zhì)可以通過(guò)化學(xué)因子或電廠誘導(dǎo)的方法進(jìn)行融合?；瘜W(xué)因子誘導(dǎo)多采用聚乙二醇4000和聚乙二醇6000作為融合及，并加入二價(jià)鈣和二價(jià)鎂等陽(yáng)離子。電融合過(guò)程是原生質(zhì)體在電廠中極化成偶極子，并沿電力線方向排列成串，再加直流脈沖擊穿原生質(zhì)體膜，導(dǎo)致原生質(zhì)體發(fā)生融合。

融合后的原生質(zhì)體具有生物活性，氮由于缺少細(xì)胞壁，不是正常的細(xì)胞，不能在普通培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，所以要涂布在高滲培養(yǎng)基上使融合子的細(xì)胞壁再生，可以通過(guò)增加高滲培養(yǎng)基的滲透壓或添加蔗糖來(lái)增加再生率。

三，融合子的檢出

融合子可以在選擇培養(yǎng)基上檢出，即通過(guò)兩個(gè)遺傳標(biāo)記互補(bǔ)來(lái)選擇，如利用營(yíng)養(yǎng)缺陷型互補(bǔ)在基本培養(yǎng)基上識(shí)別融合子。此外可以利用熒光染色，將兩個(gè)親株用不同的熒光色素染色，融合后再有熒光裝置的立體顯微鏡下觀察融合子，如果在一個(gè)個(gè)體上觀察到雙親的兩種熒光色素，即為融合子。

通過(guò)上述方法產(chǎn)生的融合子如果產(chǎn)生了雜合雙倍體或單倍重組子，其遺傳性狀比較穩(wěn)定。但也可能產(chǎn)生的融合是一種短暫的融合，會(huì)再次分離成親本遺傳型。所以還要再進(jìn)行多次篩選，找到穩(wěn)定的融合子。