斜面孢子培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)室的相對(duì)濕度對(duì)孢子形成的速度、數(shù)量和質(zhì)量有很大影響。空氣中相對(duì)濕度高時(shí)，培養(yǎng)基內(nèi)的水分蒸發(fā)少，相對(duì)濕度低時(shí)，培養(yǎng)基內(nèi)的水分蒸發(fā)多。例如，在我國(guó)北方干燥地區(qū)，冬季由于氣候干燥，空氣相對(duì)濕度偏低，斜面培養(yǎng)基內(nèi)的水分蒸發(fā)的快，致使斜面下部含有一定水分，而上部易干癟，這時(shí)孢子長(zhǎng)得快，且從斜面下部向上長(zhǎng)。冬季時(shí)空氣相對(duì)濕度高，斜面內(nèi)水分蒸發(fā)的滿，這時(shí)斜面孢子從上部往下長(zhǎng)，下部常因積存冷凝水，致使孢子生長(zhǎng)。試驗(yàn)表明，子啊一定條件下培養(yǎng)斜面孢子時(shí)，在北方相對(duì)濕度控制在40%~45%，而在南方相對(duì)濕度控制在35%~42%，所得孢子質(zhì)量較好。一般來(lái)說(shuō)，真菌對(duì)濕度要求偏高，而放線菌對(duì)濕度要求偏低。

在培養(yǎng)箱培養(yǎng)時(shí)，如果相對(duì)濕度偏低，可放入盛水的平皿，提高培養(yǎng)箱內(nèi)的相對(duì)濕度為了保證新鮮空氣的較好，培養(yǎng)箱每天宜開(kāi)啟幾次，以利于孢子生長(zhǎng)，現(xiàn)代化的培養(yǎng)箱是恒溫、恒濕，并可換氣，不用人工控制。最適培養(yǎng)溫度和濕度是相對(duì)的，例如相對(duì)濕度。培養(yǎng)基組分不同，對(duì)微生物的最適濕度會(huì)有影響。培養(yǎng)濕度、培養(yǎng)基組分不同也會(huì)影響微生物培養(yǎng)的最適相對(duì)濕度。

培養(yǎng)時(shí)間和冷藏時(shí)間 絲狀菌在斜面培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程可分為5個(gè)階段:孢子發(fā)芽和基內(nèi)菌絲生長(zhǎng)階段;氣生菌絲生長(zhǎng)階段;孢子形成階段;孢子成熟階段;斜面衰老菌絲自溶階段。孢子的培養(yǎng)時(shí)間對(duì)孢子質(zhì)量有影響?；鶅?nèi)菌絲和氣生菌絲內(nèi)部的核物質(zhì)和細(xì)胞質(zhì)處于流動(dòng)狀態(tài)，如果把菌絲斷開(kāi)，各菌絲片斷之間的內(nèi)容不同的，有的片斷中含有核粒，有的片斷中和有核粒，而核粒的多少亦不均勻，該階段的菌絲不適宜于菌種保存和傳代。而孢子本身是一個(gè)獨(dú)立的遺傳體，其遺傳物質(zhì)比較完整，因此孢子用于傳代和保存均能保持原始菌種的基本特征。但是孢子本身亦有年輕與衰老的區(qū)別。一般來(lái)說(shuō)衰老的孢子不如年輕孢子，因?yàn)樗ダ系逆咦右言谥鸩竭M(jìn)入發(fā)芽階段，核物質(zhì)趨于分化狀態(tài)。孢子的培養(yǎng)工藝一般選擇在孢子成熟階段時(shí)終止培養(yǎng)，此時(shí)顯微鏡下可見(jiàn)到成串孢子或游離的分散孢子，如果繼續(xù)培養(yǎng)，則進(jìn)入斜面衰老菌絲自溶階段，表現(xiàn)為斜面外觀變色。發(fā)暗或黃、菌層下陷、有時(shí)出現(xiàn)白色斑點(diǎn)或發(fā)黑。白斑便是孢子發(fā)芽長(zhǎng)出第二代菌絲，黑色顯示菌絲自溶。斜面孢子的的冷擦?xí)r間，對(duì)包子質(zhì)量也有影響，其影響隨菌種不同而異，總的原則是冷藏時(shí)間宜短不宜長(zhǎng)。曾有報(bào)道，在鏈霉素生產(chǎn)中，斜面孢子在6度冷藏2個(gè)月后的發(fā)酵單位比冷擦1個(gè)月的低18%，冷藏3個(gè)月后則降低35%。