種子質(zhì)量的控制 種子質(zhì)量是影響發(fā)酵生產(chǎn)水平的重要因素。種子質(zhì)量的優(yōu)劣，主要取決于菌種本身的遺傳特性和培養(yǎng)條件兩個方面。這就是說既要有優(yōu)良的菌種，又要有良好的培養(yǎng)條件才能獲得高質(zhì)量的種子。影響孢子質(zhì)量的因素及其控制:孢子質(zhì)量與培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度、濕度、培養(yǎng)時間、接種量等有關(guān)，這些因素相互聯(lián)系、相互影響，因此必須全面考慮各種因素，認真加以控制。

一，培養(yǎng)基

構(gòu)成孢子培養(yǎng)基的原材料，其產(chǎn)地、品種、加工方法和用量對孢子質(zhì)量都有一定的影響。生產(chǎn)過程中孢子質(zhì)量不穩(wěn)定的現(xiàn)象，常常是原材料質(zhì)量不穩(wěn)定所造成的。原材料產(chǎn)地、品種和加工方法的不同，會導(dǎo)致培養(yǎng)基中微量元素和其他營養(yǎng)成分含量的變化。例如，由于生產(chǎn)蛋白胨所用的原材料及生產(chǎn)工藝的不同，蛋白胨的微量元素含量、磷含量、氨基酸組分有所不同，而這些不同牌號的瓊脂含有不同的無機離子造成的。

此外，水質(zhì)的影響也不能忽視，這是由于不同牌號的瓊脂含有不同的無機離子造成為水質(zhì)波動的原因。為了避免水質(zhì)波動對孢子質(zhì)量的影響，可在蒸餾水或無鹽水中加入適量的無機鹽，供配制培養(yǎng)基使用。例如在配置生產(chǎn)根瘤菌的斜面培養(yǎng)基時，有時在無鹽水內(nèi)加入0。02%mgso4，提高根瘤菌發(fā)酵產(chǎn)量。為了保證孢子培養(yǎng)基的質(zhì)量，斜面培養(yǎng)基所用的主要原材料，糖、氮、磷含量需經(jīng)過化學(xué)分析及搖瓶發(fā)酵試驗合格后才能使用。制備培養(yǎng)基時要嚴格控制滅菌后培養(yǎng)基質(zhì)量。斜面培養(yǎng)基使用前，需在適當(dāng)溫度下放置一定的時間，使斜面無冷凝水呈現(xiàn)，水分適中有利于孢子生產(chǎn)。

配制孢子培養(yǎng)基還應(yīng)該考慮不同代謝類型的菌落對多種氨基酸的選擇。菌種在固體培養(yǎng)基上課呈現(xiàn)多種不同代謝類型的菌落，各種氨基酸對菌落的表現(xiàn)不同。氮源品種越多，出現(xiàn)的菌落類型也越多，不利于生產(chǎn)的穩(wěn)定。斜面培養(yǎng)基上用較多單一的氮源，可抑制某些不正常型菌落的出現(xiàn)；而對分離篩選的平板培養(yǎng)基則需加入較復(fù)雜的氮源，使其多種菌落類型充分表現(xiàn)，以利篩選。因此在制備固體培養(yǎng)基時有兩天經(jīng)驗：

a.共生產(chǎn)用的孢子培養(yǎng)基或作為制備砂土孢子或傳代所用的培養(yǎng)基要用比較單一的氮源，以便保持正常菌落類型的優(yōu)勢；

b.作為選種或分離用的平板培養(yǎng)基，則需采用較復(fù)雜的有機氮源，目的是便于選擇特殊代謝的菌落。

二。培養(yǎng)溫度和濕度

微生物在一個較寬的溫度范圍生長。但是，要獲得高質(zhì)量的孢子，其最適宜區(qū)間很狹窄。一般來說，提高培養(yǎng)溫度，可使菌體代謝活動加快，縮短培養(yǎng)時間，但是，菌體的糖代謝和氮代謝的各種酶類，對溫度的敏感性是不同的。因此，培養(yǎng)溫度不同，菌的生理狀態(tài)也不同，如果不是用最適宜培養(yǎng)的孢子，其生產(chǎn)能力就會下降。不同的菌株要求的最適宜溫度不同，需經(jīng)實踐考察確定。例如，龜裂鏈霉菌斜面最適溫度為36。5~37度，如果高于37度，則孢子成熟早、易老化，接入發(fā)酵罐后，就會出現(xiàn)菌絲對糖、氮利用緩慢，氨基酸回升提前，發(fā)酵產(chǎn)量降低等現(xiàn)象。培養(yǎng)溫度控制地一些，則有利于孢子的形成。龜裂鏈霉菌斜面先放在36。5度培養(yǎng)3d，在放在25。5度培養(yǎng)1d，所得的孢子數(shù)量比在36。5培養(yǎng)4d所得的孢子數(shù)量增加3~7倍。