一個(gè)優(yōu)良的菌種被選育出來(lái)以后，要保持其生產(chǎn)性能的穩(wěn)定、不污染雜菌、不死王，這就是需要對(duì)菌株進(jìn)行保藏。

一，菌種保藏的原理

菌種保藏主要是根據(jù)菌種的生理、生化特性，人工創(chuàng)造條件使菌體的代謝活動(dòng)處于休眠狀態(tài)。保藏時(shí)，一般利用菌種的休眠體，創(chuàng)造最有利與休眠活動(dòng)的環(huán)境條件，如低溫、干燥、隔絕空氣或氧氣、缺乏營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等，使菌體的代謝活性處于最低狀態(tài)，同時(shí)也應(yīng)考慮到方法經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便。由于微生物種類繁多，代謝特點(diǎn)各異，對(duì)各種外界環(huán)節(jié)因素的適宜能力不一致，一個(gè)菌種選用何種方法保藏較好，要根據(jù)菌體情況而定。

二， 菌種保藏方法
1. 斜面低溫保藏法 本方法是利用低溫降低菌種的新陳代謝，使菌種的特性在短時(shí)期內(nèi)保持不變。將新鮮斜面上長(zhǎng)好的菌體或孢子，置于4度冰箱中保存。一般的菌種均可用詞方法保存1~3個(gè)月。保存期間要注意冰箱的溫度，不可波動(dòng)太大，不能在0度以下保存，否則培養(yǎng)基會(huì)結(jié)冰脫水，造成菌種性能衰退或死亡。

2. 液體石蠟封存保藏法 在斜面菌種上加入滅菌后的液體石蠟，用量高出于斜面1cm，使菌種與空氣隔絕，試管直立，置于4度冰箱保存。保存期約1年。此法適用于不能以石蠟為碳源的菌種。液體石蠟采用蒸汽滅菌。

3. 固體曲保藏法 這是根據(jù)我國(guó)傳統(tǒng)制曲原理加以改進(jìn)的一種方法，適用于產(chǎn)孢子的真菌，該法采用麩皮、大米、小米或麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為產(chǎn)孢子培養(yǎng)基，使菌種產(chǎn)生大量的休眠體后加以保存。該法的要點(diǎn)是控制適當(dāng)?shù)乃?。例如在采用大米保藏孢子時(shí)，先取大米充分吸水膨脹，然后倒入搪瓷內(nèi)蒸15min，最后抽查含水量，合格后備用。將要保存的菌種制成孢子懸浮液，取適量加入已滅菌的大米培養(yǎng)基中，敲散拌勻，鋪成斜面狀，在一定溫度下平培養(yǎng)，在培養(yǎng)過(guò)程中要注意翻動(dòng)，待孢子成熟后，取出置冰箱保存，或抽真空至水分含量在10%以下，放在盛有干燥劑的密封容器中低溫或室溫保存。保存期為1~3年。

4. 沙土管保藏法 本方法是用人工方法模擬自然環(huán)境使菌種得以棲息。使用于產(chǎn)孢子的放線菌、霉菌以及產(chǎn)芽孢的細(xì)菌。沙土是沙和土的混合物，沙和土的比例為3:2或1:1，將黃沙和泥土分別洗凈，過(guò)篩，按比例混合后，裝入小試管內(nèi)，裝斜高度約為1cm，經(jīng)間歇滅菌2~3次，滅菌烘干，并作無(wú)菌檢查后備用。將要保存的斜面菌種刮下，直接與沙土混合；或用無(wú)菌水洗下孢子，制成懸浮液，再與沙土混合?；旌虾蟮纳惩凉芊旁谑⒂形逖趸谆驘o(wú)水氧化鈣的干燥器中，用真空泵抽氣干燥后，放在干燥低溫環(huán)境下保存。此法保存期可達(dá)1年以上。

5. 冷凍干燥法 此法的原理是在低溫下迅速地 將細(xì)胞凍結(jié)以保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整，然后在真空下時(shí)水分升華。這樣菌種的生長(zhǎng)和代謝活動(dòng)處于極低水平，不易發(fā)生變異或死亡，因而能長(zhǎng)期保存，一般為5~10年。此法適用于各種微生物。具體的做法是將菌種制成懸浮液，與保護(hù)劑混合，放在瓶?jī)?nèi)，用低溫酒精或干冰使之速凍，在低溫下用真空泵抽干，最后放真空瓶中存放，低溫保存?zhèn)溆谩?/p>

6. 液氮超低溫保藏法 前面集中菌種保藏法，在保存過(guò)程中菌種都有不同程度的死亡，特別對(duì)一些不產(chǎn)孢子的菌體保存的效果不夠理想。微生物在-130度以下，新陣代謝活動(dòng)停止，這種環(huán)境下可永久保存微生物菌種。液氮的溫度可達(dá)-196度，用液氮保存微生物菌種已獲得滿意的結(jié)果。液氮超低溫保藏法簡(jiǎn)便易行，關(guān)鍵是要有液氮罐。低溫冰箱等設(shè)備。該方法要點(diǎn)是：將要保存的菌種置于10%甘油或二甲基亞砜保護(hù)劑中，密封與瓶中，現(xiàn)將菌液降至0度，再以每分鐘降低1度的速度，一直降至-35度，然后將瓶子放入液氮罐。